Western Blotting
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小分子蛋白Western blot 检测
实验概要 1.目的检测小分子蛋白抗体 2.适用范围单克隆抗体和多克隆抗体 实验原理 将经电泳分离的抗原转印到膜上作为固相,利用酶标记的抗抗体以检测已...[详细]
发布时间:2020-02-18 20:56:17 -
蛋白质印迹的实验原理、方法与步骤
实验原理 Western Blot(蛋白质印迹或免疫印迹)技术,以蛋白质为检测对象,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。实验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAG...[详细]
发布时间:2016-07-31 11:16:44 -
免疫印迹(Western Blotting)的基本原理及应用
免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术,在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物,然后利用抗原-抗体的特异性反应,从蛋白混合...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:34:35 -
Western Blot中抗体相关的问题
1、做细胞信号传导,要做磷酸化某因子Western Blot,其二抗有何要求? 解答:对二抗无要求,要看你实验条件来选择,一般推荐用HRP标记的二抗。 2、同...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:24:29 -
Protocol:Western Blotting
Western Blot theory overview Similar to ELISAs, western blot uses antibodies to detect and analyze specific proteins in a given sample of ti...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:15:51 -
Cell Lysis and Western Immunoblotting Protocol
WB——蛋白质印迹法IHC 1. Solutions and Reagents 1.1. 1X Phosphate Buffered Saline (PBS) 10-fold diluted 10X PBS buffer (which contains 0.58 ...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:15:15 -
Western blotting知识问答
WesternBlotting一般用于什么样的实验? Westernblotting是一个用于蛋白质分析的常规技术,它可以从蛋白混合物中检测出目标蛋白,从而半定量或定性(...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:14:32 -
Western Blotting 各种问题及解决办法
问题 可能原因 可能采取的措施 背景高且均一 1. 抗体浓度过高 降低抗体(一抗 / 二抗)浓度 2. 封闭液选择不当 比较不同封闭液 3. 封闭不完全 根据不...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:13:55 -
Western blot阴性怎么办?
Western blot是最常用的实验方法,但意义并不寻常,其结果的有无往往决定着下一步实验的走向。当您辛辛苦苦地花费近两天时间提蛋白、电泳、转...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:13:07 -
Western Blot的基本原理及操作流程
【实验原理】 一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除ELISA法外,也可...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:08:22 -
Western Blot实验中滤纸、胶和膜的问题
1、NC膜、PVDF膜、尼龙膜怎样鉴别? 解答:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素(NC)膜是目前应用最广的一种固相支持物,价格最...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:07:31 -
Western Blot操作流程
一、蛋白提取 (一)准备:1×PBS、吸管、冰盒、细胞裂解液、PMSF(蛋白酶抑制剂)、1.5ml和0.5mlEP管、双蒸水、滤纸、超声仪(用之前、之后及处理不...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:06:48 -
Western Blot Anglysis蛋白质印迹免疫分析过程
【基本原理】 蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后,在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上,经封闭后再用抗待检蛋...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:06:11 -
Western蛋白转印的一些优化方法
从SDS凝胶中进行Western蛋白转印的优化需要对一系列参数进行考虑。目的是转印所有凝胶上的蛋白并将其定量地转移到转印膜上。进行高效转印需要一定程度...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:05:34 -
Western Blot过程中常见问题分析
Western Blot 过程中常见的问题及可能原因分析 问题 可能原因 验证或解决办法 背景高 膜没有完全均匀湿透 使用100% 甲醇浸透膜5-10min 洗膜不充分 增...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:04:36 -
半干法和湿法Western Blot转膜
在电流的作用下,使蛋白质从胶转移至固相载体(膜)上。膜的选择:印迹中常用的固相材料有NC膜、DBM、DDT、尼龙膜、PVDF等。我们选用PVDF(聚偏二氟乙烯)...[详细]
发布时间:2016-02-17 14:03:01 -
Western Blotting试验技术问答
Western Blotting试验技术问答,本文来自于GE公司的技术答疑集锦,针对于世界上第一个化学发光试剂ECL。...[详细]
发布时间:2012-02-03 10:38:28
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